초보자도 쉽게! 페트리필름 EC 카운트 플레이트 해석하기

 

 

품질관리 필수템, 효모 및 곰팡이 측정에 최적화된 Petrifilm®

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식품 위생과 안전이 소비자의 구매 결정에 결정적 영향을 미치는 시대입니다. 특히 HACCP, ISO22000 등의 국제 표준이 요구되는 식음료 제조 현장에서는 대장균 검사와 콜리폼 검사가 제품의 품질을 결정짓는 핵심 기준이 됩니다. 이 모든 위생 기준을 한 번에 해결할 수 있는 솔루션, 바로 페트리필름 EC 카운트 플레이트(Petrifilm E.coli/Coliform Count Plate)입니다.

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페트리필름이란 무엇인가?

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페트리필름(Petrifilm)은 3M 혹은 Neogen과 같은 글로벌 브랜드에서 개발한 건조 필름 배지입니다. 전통적인 한천배지(Agarplate)를 대체할 수 있는 공간 효율적이고 정량 정확도가 높은 배양지로, 특히 대장균 검사, 콜리폼 검사, 총균수 측정 등에 최적화되어 있습니다.

• 얇고 부피가 작아 인큐베이터 공간을 85% 절약
• 샘플을 도포하고 24~48시간 후 시각적 판별 가능
• E.coli와 총 Coliform 을 동시에 측정

이처럼 간편한 사용성과 신뢰도 높은 판독력을 동시에 갖추고 있어, 실험실 전문가뿐 아니라 식품 제조 현장의 실무자, 위생 관리자 모두에게 이상적인 검사 솔루션으로 자리 잡고 있습니다.

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왜 EC 카운트 플레이트인가?

‘EC’는 E.coli(대장균)와 Coliform(대장균군) 을 동시에 측정할 수 있는 기능을 뜻합니다. 이 제품은 두 가지 균종을 색상과 가스 형성 여부를 통해 분리하여 시각적으로 구분할 수 있습니다.

• 파란색+가스 형성 → E.coli로 판단
• 붉은색+가스 형성 → 기타 콜리폼
• 가스 없는 청색/적색 → 판독 대상 제외

즉, 시료 내 대장균이 존재하는 경우, 파란색 침전물이 가스를 동반한 형태로 등장하며 이를 통해 사용자는 정확한 정량적 판독이 가능합니다. 사용자의 눈으로 확인 가능하다는 점은 초보자에게도 매우 큰 장점입니다.

대장균군 (Coliforms)

• 정의: 유당을 분해하여 산과 가스를 생성하는 그람음성 간균들의 군집
• 대표균: Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter, 일부 Escherichia 종 포함
• 검사 목적: 위생 지표 — 세척 상태, 환경오염, 공정 오염 여부를 간접적으로 판단
• 특징: 대부분 비병원성
• 음용수나 식품의 1차 오염 여부를 판단할 수 있는 기준

대장균 (E. coli)

• 정의: Coliforms 중에서도 Escherichia coli 종에 속하는 세균
• 검사 목적: 직접적인 분변 오염 여부 판단
• 특징: 대다수 균주는 무해하지만, 일부는 병원성 (ex. E. coli O157:H7) , 일반적으로 사람이나 동물의 장 속에서만 발견되기 때문에, 검출 시 분변 유래 오염으로 간주

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사용법 – 실제보다 쉬운 실험, 누구나 가능한 Petrifilm 활용법

 

Petrifilm E. coli/Coliform Count Plate의 가장 큰 장점 중 하나는 실험실 경험이 없어도 사용할 수 있을 만큼 간단하다는 것입니다. 다음은 실험의 전 과정을 단계별로 상세히 설명한 내용입니다.

1️⃣ 시료 준비 및 희석

검사 대상이 되는 식품, 수질, 환경 샘플 등을 적절한 희석액에 일정 비율로 희석합니다.

• 권장 희석액: Butterfield's phosphate buffer, 0.1% peptone water, 생리식염수 등
• 주의: citrate, bisulfite, thiosulfate가 포함된 희석액은 페트리필름의 성능을 방해하므로 사용 금지

💡 팁: 희석 시 샘플의 pH는 6.6~7.2 범위 내로 조절하는 것이 가장 이상적입니다.

2️⃣ 1mL 시료 점적 (Dispensing)

플레이트를 평평한 실험대 위에 놓고, 상단 투명 필름을 부드럽게 들어 올립니다. 그다음, 피펫을 사용하여 1mL의 희석 샘플을 하단 필름 중심부에 점적합니다.

• 피펫은 수직으로 유지하고, 샘플이 중앙에 정확히 떨어지도록 합니다.
• 공기방울이 들어가지 않도록 천천히 점적하는 것이 중요합니다.

3️⃣ 스프레더(Spreader)로 도포

 

전용 스프레더(플라스틱 반구형 기구)를 사용하여 샘플을 고르게 펴 바릅니다.

• 스프레더는 필름의 중앙에 수직으로 올려 놓고 한 번만 눌러줍니다.
• 절대 스프레더를 좌우로 문지르지 말고 누른 뒤 바로 떼어내야 합니다.왜냐하면 젤 형성 전에 문지르면 필름 밖으로 샘플이 빠져나가거나 균일한 도포가 되지 않기 때문입니다.

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4️⃣ 젤 형성 대기 (1분 정지)

샘플 도포가 끝난 후, 상온에서 1분간 그대로 둡니다.이 과정을 통해 젤이 형성되어 고정된 배지 상태로 바뀝니다.젤 형성 전에는 절대 움직이거나 들어 올리지 마세요.

5️⃣ 배양 (Incubation)

• 플레이트를 다시 투명 필름이 위쪽으로 향하게 하여 인큐베이터에 넣습니다.
• 권장 온도: 35~37℃
• 배양 시간: 24~48시간 (보통 24시간이면 판독 가능하지만, 경우에 따라 최대 48시간까지도 허용됩니다)

💡 주의: 배양 시 최대 20장까지 수직 적재가 가능하며, 습도 손실을 방지하기 위해 인큐베이터 내부에 물을 함께 넣어두는 것이 좋습니다.

6️⃣ 판독 (Interpretation)

배양이 완료되면 판독을 시작합니다. 페트리필름은 색상과 가스 형성 여부를 기준으로 시각적 식별이 가능합니다.

• E. coli → 청색 콜로니 + 기포(가스) 존재
• 기타 콜리폼 → 적색 또는 청적색 콜로니 + 기포 존재
• 기포 없이 색상만 존재하는 경우 → 일반적으로 무시하거나 재검토 필요

배양 결과가 너무 많아 150 CFU 이상일 경우, “TNTC (Too Numerous To Count)” 상태로 간주하며, 샘플을 희석하여 재검사해야 합니다.

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플레이트 해석법 – 초보자도 전문가처럼

Petrifilm E. coli/Coliform Count Plate는 단순히 대장균 유무를 확인하는 용도가 아니라, 정량적 분석을 통해 식품 위생 수준을 평가할 수 있는 과학적 도구입니다. 정확한 해석을 위해서는 색상, 기포(가스) 형성 여부, 콜로니 수를 올바르게 인식해야 합니다.

 

1️⃣ 청색 콜로니 + 기포 있음 → E.coli (대장균)

• 대부분의 E. coli는 β-glucuronidase 효소를 생성합니다.
• 이 효소는 플레이트 내 지시제(BCIG)와 반응하여 청색 또는 청적색의 콜로니를 형성합니다.
• 동시에 젖당을 발효하여 기포(가스)를 발생시키므로, 두 가지 기준이 충족되어야만 ‘대장균’으로 간주됩니다.

📌 주의: 청색만 있고 가스가 없는 경우는 E. coli로 판독하지 않습니다. 

2️⃣ 적색 콜로니 + 기포 있음 → 기타 콜리폼(Coliforms)

• 콜리폼군(Coliform)은 젖당을 발효하지만 glucuronidase를 생성하지 않는 경우가 많아 붉은 콜로니만 나타납니다.
• 그러나 기포가 함께 존재할 경우, 젖당을 발효한 것이므로 콜리폼으로 간주합니다.

💡 예: Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter 등이 여기에 해당합니다.

3️⃣ 단순한 기포만 있음 → 불량 기포 또는 잡기포, 분석 제외

• 기포는 있지만 주변에 콜로니가 형성되지 않은 경우, 이는 ‘아티팩트 버블(artifact bubble)’일 가능성이 높습니다.
• 원인:
  • 샘플을 너무 빨리 도포했거나
  • 공기가 함몰되어 생긴 기포

4️⃣ 150 CFU 이상 → TNTC (Too Numerous To Count)

• Petrifilm EC 플레이트의 권장 최대 계수치는 150 콜로니입니다.
• 이보다 많을 경우:
  • 콜로니가 겹쳐 보이거나,
  • 전체 젤 색이 진보라색으로 변색되는 등
  • 정확한 개별 집락 계수가 어려워집니다.
• 따라서 이러한 경우는 “TNTC”로 기록하고 샘플을 10배 이상 희석하여 재검사해야 합니다.

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사용자 팁 – 실험 결과의 신뢰도를 높이기 위해 반드시 지켜야 할 핵심 지침

 

페트리필름을 사용한 대장균 검사 및 콜리폼 검사는 간편하지만, 신뢰도 높은 결과를 얻기 위해서는 몇 가지 실험 조건과 주의사항을 반드시 따라야 합니다. 특히 결과 판독 정확도에 민감한 경우, 아래의 팁은 실험 성공률을 크게 좌우할 수 있습니다.

1️⃣ 샘플 pH는 6.6~7.2 사이로 조정

• Petrifilm 배지 내 미생물 성장에는 중성(pH 7.0 전후) 조건이 가장 이상적입니다.
• 샘플의 pH가 너무 낮거나 높을 경우, 균 생장 억제 혹은 오염균 과다 증식 문제가 발생할 수 있습니다.
• 따라서 샘플 희석 전에 pH 측정 후, 필요 시 조정해주는 것이 중요합니다.

💡 Tip: pH는 휴대용 pH 측정기나 pH 시험지를 사용하여 측정할 수 있으며, 필요시 NaOH 또는 HCl 소량 첨가로 조절합니다.

2️⃣ Citrate, bisulfite, thiosulfate가 포함된 희석액 사용 금지

• 이 세 가지 물질은 미생물 성장 억제 성분으로 작용할 수 있어, 실제 대장균이 있어도 성장이 제한되거나 판독이 왜곡될 수 있습니다.
• 특히 citrate는 금속 이온을 킬레이트하여 균 성장에 필요한 미네랄을 차단하기 때문에, 절대 사용하면 안 됩니다.

✅ 권장 희석액:

• Butterfield’s phosphate buffer
• 0.1% peptone water
• 생리식염수 (0.85–0.90%)
• Ringer’s solution (1/4 strength)
• 증류수

3️⃣ 1mL 이상 점적 금지, 공기방울 제거 필수

• 페트리필름의 배지는 정확히 1mL 용량에 맞춰 설계되어 있습니다.
  이보다 더 많은 양을 점적할 경우:
  • 젤이 넘치거나 퍼짐 불균형
  • 집락 중복 형성
  • 해석 오류 가능성 발생
• 또한, 공기방울(에어버블)이 들어가면 플레이트 내 가스 콜로니와 혼동될 수 있으므로, 점적 후 필름을 천천히 덮고 손가락으로 가장자리에서 중심 쪽으로 밀며 공기 제거가 필요합니다.

4️⃣ 판독 시 조명은 전면광(Front lighting) + 후면광(Back lighting) 병행 사용 추천

• 페트리필름은 투명한 상단 필름과 착색된 배양지 덕분에 조명 각도에 따라 판독 정확도가 달라집니다.
• 전면광:  표면 색상 및 콜로니의 형태 식별에 유리
• 후면광: 가스 형성 확인 및 젤 배경색 변화 확인에 효과적

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식품 미생물 검사는 단순한 청결 확인을 넘어, 제품의 신뢰성과 기업의 생존에 직결되는 핵심 요소입니다. 식중독, 위생 이슈, 리콜 사태는 단 한 번의 검사 소홀로도 발생할 수 있으며, 이는 단순한 품질 저하를 넘어 브랜드 이미지와 시장 신뢰도까지 무너뜨릴 수 있습니다. 바로 이 지점에서 Petrifilm E.coli/Coliform Count Plate는 강력한 역할을 합니다.
이 키트는 오랜 경험을 가진 실험실 전문가뿐 아니라, 현장 위생 관리자, 식품 스타트업 창업자, 품질관리 초심자, 심지어 대학 실습생에게도 정확하고, 반복 가능하며, 시간과 인력을 아껴주는 실용적인 미생물 검사 솔루션으로 자리 잡고 있습니다.

 

처음에는 다소 생소하게 느껴질 수 있습니다.하지만 이 글에서 다룬 내용을 천천히 따라 해본다면,

• Petrifilm의 구조,
• E.coli와 콜리폼의 구분법,
• 판독 기준과 해석법,
• 정확한 실험 조건과 주의사항

을 모두 이해할 수 있을 것입니다. 전문가가 되기 위한 첫걸음은, 정확한 기준을 이해하고 그것을 반복하는 습관에서 시작됩니다.
그리고 Petrifilm은 그런 '처음'을 안전하고 간편하게 도와주는 도구입니다.

 

[실험실 기자재 - 미생물배지] - 리스테리아 검출 솔루션, Petrifilm EL Plate 사용법부터 분석법까지 한번에

 

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